产品货号：
RFT047
中文名称：
超低分子量蛋白Marker IV(3.3～45kD)
英文名称：
产品规格：
10T
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
本制品包含2种多肽和3种低分子量蛋白质组成，分子量范围为3.3kD～45kD。可以用来判断SDS-PAGE上多肽和小蛋白的分子量。
保存：-20℃，有效期1年。
第一次收到该产品，室温融化后，彻底混匀，离心快甩将溶液完全收集到管底，根据需要适量分装成小管，-20℃贮存，每次取一小管使用；本制品每次使用前，要95℃加热处理5分钟。
一、制胶
二、电泳
三、染色
根据常规实验步骤，用配方5和6（附表1）进行染色和观察。如果使用配方5进行染色时效果不好或考虑其毒性，请选择QuickLan蛋白染色液(货号：RFT053)，该产品能在5分钟之内完成蛋白的染色，不至于小肽在染色和脱色中从凝胶中脱离，是常规染色液的理想替代品。
附表1：小分子蛋白质SDS-PAGE电泳试剂配制
相关搜索：超低分子量蛋白Marker IV(3.3～45kD)，蛋白Marker，超低分子量，蛋白电泳Marker，蛋白质分子量标准
| 组分 | 规格 |
| 超低分子量蛋白Marker IV(3.3～45kD) | 50μL |
| 说明书 | 1份 |
保存：-20℃，有效期1年。
第一次收到该产品，室温融化后，彻底混匀，离心快甩将溶液完全收集到管底，根据需要适量分装成小管，-20℃贮存，每次取一小管使用；本制品每次使用前，要95℃加热处理5分钟。
一、制胶
- 配制分离胶
- 按照表一将不同体积的双蒸水、40%PAA(19:1)、凝胶缓冲液和乙二醇加入到小烧杯中混合。
- 加入10%APS和TEMED，立即混匀5～10秒，以使溶液充分混匀。
- 在凝胶模具中迅速灌入适量分离胶溶液，然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-3cm的水层，使凝胶表面保持平整。
- 静置5～10分钟，待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面表示凝胶已聚合。
表一：一块0.75mm mini胶用量
注：如非必须，不要使用1.0mm和1.5mm的凝胶，尽量使用厚度0.75mm的凝胶，这样会减少电泳后染色和脱色的时间。成分 分离胶 浓缩胶 18％T,5%C/6.0mL 5％T,3.3%C/2mL 40% PAA(19:1) 2.7mL / 40% PAA(29:1) / 0.25mL 4×多肽电泳凝胶缓冲液 1.5mL 0.5mL 乙二醇（电泳级） 1.8mL / ddH2O / 1.25mL 10％APS 50～65μL 20μL TEMED 6μL 2μL
- 按照表一将不同体积的双蒸水、40%PAA(19:1)、凝胶缓冲液和乙二醇加入到小烧杯中混合。
- 配制浓缩胶
去除覆盖在分离胶上的水层，用滤纸将残留的水吸去。- 按照表一将不同体积的双蒸水、40%PAA(29:1)和凝胶缓冲液加入到小烧杯中混合。
- 加入10%过硫酸铵和TEMED，立即混匀5～10秒，以使溶液充分混匀。
- 将梳子插入凝胶内，避免产生气泡。
- 静置20～30分钟装待凝胶聚合。
- 按照表一将不同体积的双蒸水、40%PAA(29:1)和凝胶缓冲液加入到小烧杯中混合。
二、电泳
- 取一管分装好的Marker样品，彻底融化，95℃加热处理5分钟，充分混匀后备用。
- 电泳前，将10×阴极缓冲液(货号：RFT227)用蒸馏水稀释成1×缓冲液备用。将电泳槽的内外槽加入1×缓冲液，轻柔拔出梳子，将Marker或蛋白样品（样品已经过2×Tricine上样缓冲液处理）加入点样孔，根据表二条件进行电泳，至蓝色指示前沿至分离胶3/4位置时即可停止电泳。整个电泳过程大约需要2～3个小时。
注：如果电泳时间过短，染色时，指示前沿容易遮挡小于5kd的小肽。
表二：多肽电泳条件恒电压 150V 起始电流 45～55mA 结束电流 10～15mA 电泳时间 2～3小时
三、染色
根据常规实验步骤，用配方5和6（附表1）进行染色和观察。如果使用配方5进行染色时效果不好或考虑其毒性，请选择QuickLan蛋白染色液(货号：RFT053)，该产品能在5分钟之内完成蛋白的染色，不至于小肽在染色和脱色中从凝胶中脱离，是常规染色液的理想替代品。
附表1：小分子蛋白质SDS-PAGE电泳试剂配制
| 配方1：40%PAA(29:1)(配制浓缩胶) 货号：RFT068 丙稀酰胺：38.67g； 甲叉双丙稀酰胺：1.33g； 用ddH2O溶解后定容至100mL，过滤后使用。 贮存：4℃ | 配方2：40%PAA(19:1)(配制分离胶) 货号：AC1914 丙稀酰胺：38g； 甲叉双丙稀酰胺：2g； 用ddH2O溶解后定容至100mL，过滤后使用。 贮存：4℃ | 配方3：4×凝胶缓冲液(配制凝胶用) [3M Tris，0.4% SDS，pH8.45] 货号：RFT231 Tris碱：36.3g； SDS：0.4g(或10%SDS：4mL)； 用HCl调pH值至8.45； 用ddH2O定容至100mL。 贮存：4℃ |
| 配方4：10×阳极缓冲液(下槽缓冲液) [2M Tris，pH8.9] 货号：RFT214 Tris碱：121.1g； 用HCl调pH值至8.9； 用ddH2O定容至500mL 贮存：4℃ 注：使用前稀释成1×阳极缓冲液使用。 | 配方5：10×阴极缓冲液(上槽缓冲液) [1M Tris，1M Tricine，1% SDS，pH8.3] 货号：RFT227 Tris碱：121.14g； Tricine：179.2g； SDS：10g； 用ddH2O溶解，定容至1000mL(不用调pH)。 贮存：4℃ 注：使用前稀释成1×阴极缓冲液使用 | 配方6：染色液 货号：RFT551 冰醋酸：100mL； 考马斯亮蓝G-250：0.25g； |
| 配方7：脱色液 货号：RFT552 冰醋酸：100mL； 水：900mL | 配方8：2×Tricine蛋白样品上样缓冲液(10mL) 货号：RFT154 1M Tris-HCl(pH6.8)：1mL； 甘油：2.4mL(3g)； SDS：0.8g； DTT：0.31g(或β-巯基乙醇：400μL)； 考马斯亮蓝G-250：2mg； 用灭菌水定容至10mL； 混匀分装-20℃贮存备用 | |
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